论文题目：Identification and characterization of emGalaseE, a β-1,4 galactosidase from Elizabethkingia meningoseptica, and its application on living cell surface

期刊名称：International Journal of Biological Macromolecules

成果所有人：陈力课题组

论文发表时间：2024年04月22日

致谢平台或仪器：质谱平台

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糖蛋白上末端半乳糖的生物功能是一个新兴的研究领域，它涉及到细胞识别、信号传导以及病原体感染等多个生物学过程。尽管科学家们在能够去除糖蛋白上末端半乳糖的酶的研究上取得了一定的进展，但迄今为止，能够直接作用于活细胞的半乳糖苷酶的相关报道仍然十分稀缺。本项工作的核心目标便是从细菌基因组中筛选并获取具有功能性的半乳糖苷酶，以期填补这一研究空白。在实验过程中，我们利用质谱平台的电喷雾电离质谱（ESI-MS）技术，成功鉴定了半乳糖苷酶的酶切键特异性，发现其主要作用于β1,4半乳糖苷键。这一发现对于理解半乳糖苷酶的作用机制至关重要。进一步地，通过基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱（MALDI-TOF）技术，我们观察到半乳糖苷酶能够特异性地酶切糖蛋白上的末端半乳糖，并且这一过程呈现出明显的浓度和时间依赖性。这意味着，通过调整半乳糖苷酶的浓度和作用时间，我们可以精确控制酶切反应的进程。最终，通过质谱检测Endo F3酶从细胞表面切下来的糖链，我们不仅证实了半乳糖苷酶具有酶切细胞表面半乳糖的能力，而且还成功地将这种酶命名为emGalaseE。这一命名不仅标志着我们在半乳糖苷酶研究领域的一个重要进展，也为未来相关生物医学应用提供了新的工具和可能性。emGalaseE的发现，不仅为研究糖蛋白上末端半乳糖的生物功能提供了新的视角，也为开发新型治疗策略，特别是在癌症和感染性疾病的治疗领域，开辟了新的道路。随着对emGalaseE功能的进一步探索，我们有望揭开更多关于糖生物学的奥秘，并为人类健康带来更多的益处。