论文题目：G Protein–Coupled Receptor Kinase 3 Exacerbates Diabetic Heart Injuries Through Direct Phosphorylation of Cannabinoid Receptor 2 in Humans and Mice | Circulation

期刊名称：circulation

成果所有人：邹云增课题组

论文发表时间：2025年08月07日

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GRKs（GPCR [G 蛋白偶联受体]激酶）是 GPCR 信号传导的关键调节因子。由于约 40%的临床药物以 GPCRs 为靶点，GRKs 也成为对抗心血管疾病的治疗靶点。通过糖尿病心脏中 GRK1 至 GRK7 的转录变化水平我们确定 GRK3 是心肌细胞中表达显著增加的主要 GRK。高血糖通过降低转录抑制因子阴阳 1(Yin-Yang 1)诱导 GRK3 表达；GRK3 的过表达降低 CB2R 的表达水平，同时增加磷酸化 CB2R 水平（S335位点），促进其内化和降解，从而加重糖尿病心脏损伤。通过心脏条件性敲除小鼠、心脏限制性腺相关病毒 9、CRISPR/Cas9介导的基因编辑（将CRISPER vector用lipo3000导入HL-1细胞后，使用流式细胞仪排序并将细胞种植于96孔板上）及药理学调节剂进行功能研究；通过苏木精-伊红染色、麦胚凝集素染色（观察心肌肥大）、天狼星红染色（评估心肌纤维化）、Masson 三色染色及超声心动图评估心脏组织病理学和功能；通过免疫沉淀、电泳迁移率变动分析、位点特异性突变、自对接及分子动力学模拟进行机制研究；通过计算机辅助虚拟筛选鉴定主要 GRK 的抑制剂；发现GRK3是加重糖尿病心脏损伤的主要G蛋白偶联受体激酶，调节 YY1 或 CB2R 均会干扰糖尿病心脏中 GRK3 的功能，YY1 依赖的 GRK3 上调通过直接磷酸化 CB2R 发挥作用，针对GRK3的小分子药物，如异绿原酸 A（通过涵盖 19,100 种化合物的虚拟筛选和计算机模拟建模鉴定得到），则在临床上对于糖尿病心肌病的治疗有一定潜力。