论文题目：One-step labeling with a fluorinated porphyrin-based probe enables in situ imaging and profiling of the thiol proteome

期刊名称：The Innovation

成果所有人：陆豪杰课题组

论文发表时间：2025年07月05日

致谢平台或仪器：Orbitrap Exploris 480

优秀案例分享：

在复杂多变的细胞微环境中，硫醇蛋白质组作为分子开关，感应氧化还原状态、调控分子互作并驱动功能转换。然而，由于硫醇具有高度敏感和瞬时反应性，其全面、精准解析面临重大技术挑战。

传统方法主要依赖点击化学，需要多步标记（如炔基标记+生物素富集/荧光分子成像），不仅流程复杂、易引入误差；而且面临样品制备“黑箱”困境。针对以上技术瓶颈，本研究以氟化卟啉（fluorinated porphyrin, FP）为核心，开发了“可视化-富集-质谱兼容”三位一体的新型探针FP-MBA，突破了传统炔基类探针依赖点击化学后修饰的局限：1）凭借FP-MBA固有的荧光特性，实现了从样品标记、原位分析到选择性富集的全流程可视化，突破了传统方法的“黑箱”困境；2）该探针独特的亲脂性使其富集流程与传统组学方法中C18脱盐步骤同步进行，大幅简化了实验操作；3）FP-MBA具备良好的质谱响应与稳定性，使可视化富集与后续质谱分析能够无缝衔接，提升了位点鉴定的可靠性。这种三位一体化设计实现了“一步标记”的硫醇动态可视化与质谱精准解析，在大幅简化实验流程的同时规避了样品污染与损耗风险，打破了传统组学样品制备“黑箱”问题，建立了可视化引导蛋白质组学分析新范式。

研究中利用SP8激光共聚焦荧光显微镜实现原位可视化分析；通过Orbitrap Exploris 480高分辨质谱仪实现半胱氨酸位点的精准鉴定。