论文题目：A Simple One-Step Deuterated Peracetylation-MALDI-MS/MS (OSDPM) Strategy for Structural Sequencing of Glycosaminoglycan Oligosaccharides

期刊名称：Analytical Chemistry

成果所有人：陆豪杰

论文发表时间：2025年08月12日

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该研究针对肝素 / 硫酸乙酰肝素（HP/HS）寡糖结构分析的难题，开发了一步氘代全乙酰化-基质辅助激光解吸电离串联质谱（OSDPM）策略。HP/HS 作为关键糖胺聚糖，参与多种生理病理过程，但其硫酸化异质性和差向异构导致结构复杂，传统方法需大量样本（>50μg）、流程繁琐，难以满足稀缺样本分析需求。OSDPM 策略核心为一步氘代全乙酰化（Ac₂O-d₆/ 吡啶，65℃反应 1h）结合 MALDI-MS/MS高通量、高灵敏、易操作等检测优势，仅需 ng 至亚 μg 级样本、耗时不足 2 小时即可完成分析。其原理通过质谱特征实现多重功能：硫酸基团电离时丢失产生 45Da 质量差以定位硫酸化位点；GlcA/GlcA2S/IdoA 形成内酯导致 63Da 质量损失，而 IdoA2S 不形成，以此区分差向异构体；GlcNS 与 GlcNAc 乙酰化后存在 3Da 质量差，实现二者鉴别。研究通过商用 HP/HS 标准品验证了方法可靠性，成功表征 17 种从猪肠黏膜分离的天然 HP/HS 聚糖（三糖至七糖，硫酸化数 2-9）。糖阵列实验进一步证实结构准确性，发现含双 IdoA2S 的聚糖与 FGF2 结合更强，SARS-CoV-2 需链长≥6 且硫酸化数≥7 才强结合，其刺突蛋白则仅依赖硫酸化强度（≥4）。该策略简化流程、提升灵敏度，解决了传统方法痛点，为 HP/HS 结构表征提供高效工具，助力其生理病理功能解析，在抗病毒、抗癌药物研发及生物标志物发现中具有重要应用价值。